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上海金达蛋白纯化系统的优缺点及纯化方法的选择
发布时间:2018-10-29   点击次数:284次
上海金达蛋白纯化系统的优缺点
增加外源蛋白的可溶性;
可在不同的宿主中表达,适用范围广;
可用不同的蛋白酶可以方便去除;
很好保留了蛋白的抗原性和生物活性,提高外原蛋白的稳定性;
高特异性,纯化方便且温和;
分子量较大,可能会影响蛋白质的功能和下游实验;
如果蛋白不可溶,很难用变性的方法纯化。
 
上海金达蛋白纯化系统纯化方法的选择
对于具有特殊性质的蛋白,可以利用特殊的方法对其进行纯化,下面就一些蛋白的特殊性质及纯化方法做一介绍。
可逆性缔合:在某些溶液条件下,有一些酶能聚合成二聚体、四聚体等,而在另一种条件下则形成单体,如相继在这两种不同的条件下按大小就可以进行分级分离。
热稳定性:大多数蛋白质加热到95℃时会解折叠或沉淀,利用这一性质,可容易地将一种经这样加热后仍保持其可溶性活性的蛋白质从大部分其它细胞蛋白质中分离开。
蛋白酶解稳定性:用蛋白酶处理上清液消化杂蛋白,可以纯化得到具有蛋白酶解抗性的蛋白质。
溶解度:影响蛋白质溶解度的外界因素很多,如溶液的pH、离子强度、介电常数和温度等。在特定的外界条件下,不同的蛋白质具有不同的溶解度。适当改变外界条件,控制蛋白质混合物中某一成分的溶解度从而将其从溶液中析出。

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